Kapat

Gen Nakavtı Yöntemi » Bilgiustam

Anasayfa
Bilim Gen Nakavtı Yöntemi » Bilgiustam
Bu içeriği değerlendir
[Toplam: 0 oy, Ortalama: 0 puan]

Gen nakavtı; bir geni çıkararak, hücre yahut organizma üstündeki tesirleri gözlemleyerek genlerin işlevini incelemek için kullanılan moleküler biyoloji yöntemidir. Geni tamamen silerek, yine mutasyonlar sokarak, genin ekspresyonunu baskılayarak yahut olgun organizmada geni düzenleyerek başarılabilir.
Gen Nakavt Şekilleri
Suni gen nakavt organizmasını kurmak için, ilgilenilen geni susturmak yahut çıkarmak için birkaç metot kullanılır. Gen nakavt şekilleri şunlardır:
• Gen susturma
• Koşullu nakavt
• Homolog rekombinasyon
• Gen sonu
• Mutasyona bakılırsa nakavtMutasyon ile Gen Nakavt
Mutasyon kanalıyla gen nakavt çoğu zaman bakterilerde gerçekleştirilir. Bu tekniğin Escherichia coli’de kullanılmasının erken bir örneği 1989 senesinde Hamilton ve arkadaşları tarafınca uygulanmıştır. Bu deneyde, geni silmek için iki ardışık rekombinasyon kullanılmıştır. Bu emek harcama, bakterilerdeki fonksiyonel bir genin çıkarılması yahut değiştirilmesinin fizibilitesini oluşturmuştur. Bu metot o zamandan beri öteki organizmalar, bilhassa de fareler benzer biçimde inceleme hayvanları için geliştirilmiştir.
Nakavt fareleri, rahatsızlık için önemi olabilecek insan eşdeğerlerine haiz genleri incelemek için yaygın olarak kullanılmaktadır. Nakavt fareleri kullanan bir araştırmanın son örneği, Ani Açıklanamayan Gece Ölüm Sendromunda (SUNDS) Xirp proteinlerinin ve Çin Han Popülasyonunda Cheng ve dostlarının Brugada Sendromundaki rollerinin araştırılmasıdır .
Araştırmacılar, iki sendromlu kişilerde Xirp genlerini taradılar ve patojenik olabilecek iki gen varyantı belirlediler. Xirp2 nakavt fareleri kullanarak, Xirp2 içermeyen sıçan kalplerinin bir dizi anormalliklere haiz bulunduğunu öğrenmişlerdir. Bu emek harcama, SUNDS ve Brugada sendromunda rol oynama olasılığı bulunan Xirp varyantlarının tanımlanmasına ve Xirp2’nin kalp fonksiyonundaki rolünü ortaya koymasına izin vermiştir.
Gen Susturma
Gen susturma yahut RNA etkileşimi (RNAi), gen nakavt emek harcamaları için popüler hale gelen daha yeni bir teknolojidir. RNAi’de, muayyen bir gen için haberci RNA’yı inaktive etmek için ufak karışan RNA (siRNA) yahut kısa saç tokası RNA (shRNA) kullanılmaktadır. Bu, gen ekspresyonunu müessir bir halde bastırır. RNAi kullanılarak gen susturulması, Bcl-2 ve p53 benzer biçimde onkogenlerin yanı sıra nörolojik rahatsızlık, irsi bozukluklar ve viral enfeksiyonlarda yer edinen genleri hedeflemek için kullanılmıştır.
Koşullu Nakavt
Gen silinmesini kullanan nakavt şekilleri, erken gelişimde yer almayan genleri incelemek için kuvvetli olmuştur. Bununla beraber, erken inkişaf esnasında etken olan genler, organizmaya öldürücü bir tesir olmaksızın çoğu zaman elenemez. Koşullu nakavt bunun üstesinden gelmenin bir yoludur. Özgün koşullu nakavt yöntemi, LoxP olarak malum kısa hedef sekansları tekrar birleştiren Cre adında olan bölgeye has bir rekombinaz kullandı. O zamandan beri başka rekombinazlar geliştirildi ve şartlı nakavt emek harcamaları için kullanılmıştır.
Önceki yöntemlerden ikisini birleştiren Kuhn, et al RNA’sının (shRNA) ekspresyonunu denetlemek için Cre rekombinaz yahut doksisiklin kullanılarak farelerde gen susturulmasının indüklenmesi için bir 2010 makalesinde bir yöntemi tanım eder. Metot, demonte farelerin tekrarlanabilir üretimi ile neticelenmiştir.
Gen Tertip
Çinko parmak nükleazları (ZFN’ler), transkripsiyon aktivatörü benzeri efektör nükleazlar (TALEN’ler) ve tertipli aralıklarla kümelenmiş kısa palindromik yine (CRISPR) benzer biçimde gen düzen sistemleri, bölgeye has rekombinazlara karşı ortaya çıkan bir alternatiftir. Bu enzimler, klonlama benzer biçimde moleküler biyolojide birçok temel yöntemin yerini almaya adım atmıştır. Koşullu gen nakavt, özgün araçlara bakılırsa birtakım avantajlara haiz oldukları başka bir örnektir.
Gen…

Kaynak:https://www.bilgiustam.com/gen-nakavti-yontemi/

Bir cevap yazın

E-posta hesabınız yayımlanmayacak. Gerekli alanlar * ile işaretlenmişlerdir

VÜCUT KİTLE İNDEKSİ

ft
in
lbs
cm
kg